By 元利科學應用部 易德明

在使用顯微鏡的時候，您可曾注意到有一些物鏡上多了一圈可調整的裝置？根據調查，大多數的顯微鏡使用者都沒有注意到，除了焦距調節以及載物臺位置之外，物鏡上也有可以調整的地方。這一圈裝置就叫做校正環，通常可以在倒立顯微鏡所配置的長工作距離物鏡上找到，此外，部分高倍率的油鏡也具備這個裝置。千萬別小看了這一圈校正環，它可是對於提升影像的解析度與清晰度有莫大的幫助喔！ 

為什麼部分物鏡要設計校正環呢？大家常用的玻片，培養皿或是多孔盤，雖然都可以直接放在倒立顯微鏡上觀察，但事實上，常用的玻片與其他塑膠容器有一項非常大的差異，那就是容器底部的厚度。一般蓋玻片的厚度約為0.17mm，而塑膠容器的底部則約為1mm，兩者相差將近6倍！再加上玻璃與塑膠的光學性質不同，因此要讓一顆物鏡能夠同時適用玻片以及塑膠容器，勢必需要設計一個能夠聚焦光線的校正裝置，而這個裝置就是物鏡上的校正環。

校正環通常位於物鏡中段，供使用者調整光線聚焦。

除了針對不同的容器厚度進行補償之外，在多光子影像的觀察過程，校正環更是不可或缺的裝置。在使用多光子系統觀察活體動物腦部或是器官時，隨著觀察樣本的深度不同，光線聚焦的位置也隨之改變，若想得到最佳的影像品質，就需要校正環的幫忙。可是目前市面上所販售的多光子物鏡，大多裝配的是手動校正環，使用者只能預先調整好位置才可進行觀察，無法隨著觀察深度自動改變校正環位置，那麼是否有一顆能夠全自動控制校正環的物鏡呢？

OLYMPUS所開發的全自動校正物鏡「TruResolution」。

OLYMPUS聽到了客戶的需求，經過多年跟日本理化學研究所（RIKEN）的合作與開發，終於推出了市面上唯一的全自動校正多光子物鏡系列──TruResolution。 

由下圖可以清楚發現，使用傳統手動物鏡時，如果沒有正確調整校正環位置，大約200μm之後，螢光影像亮度以及解析度就會大幅下降；但是使用全自動校正物鏡後，不論樣本在任何深度，均可以將校正環保持在最佳位置。同時在進行Z軸影像擷取時，校正環可以隨著深度不同自動調整，以確保最佳的光學效果。

使用傳統物鏡（下排）時，當觀察深度超過200μm後，影像品質便會顯著降低；相較之下，TruResolution（上排）在各個深度都有一致的影像表現。

傳統物鏡（左）容易隨觀察深度改變而使影像變得模糊；TruResolution（右）在各個深度都能獲得清晰影像。如果您在多光子影像實驗中有遇到亮度不夠，或是解析度不佳的情形，不妨問問您身邊的元利影像專員，也許TruResolution就是您尋覓已久的答案喔！